Өнімдер

LecA (PA-IL) Pseudomonas aeruginosa өндіретін цитотоксикалық лектин және адгезин болып табылады, ол жоғары спецификалық және жақындығы бар гидрофобты галактозидтерді байланыстырады.lecA-egfp трансляциясының синтезін және биофильмнің жасушадан тыс матрицасының иммуноблот талдауын қолдану арқылы біз lecA биофильмде өсірілген жасушаларда экспрессияланатынын көрсетеміз.Полистиролдағы да, тот баспайтын болаттан да биопленканың статикалық талдауларында биопленканың тереңдігі мен бетінің жабуы lecA мутациясының нәтижесінде төмендеді және LecA-ны шамадан тыс өндіретін PAO-P47 штаммында күшейтілді.Болат купондарындағы lecA мутанты емес, PAO-P47 штаммының биоқабықша бетін жабуы да изопропил-бета-D-тиогалактозид (IPTG) немесе p-нитрофенил-альфа-D-галактозид (IPTG) қатысуымен өсу арқылы тежелді. ҰПГ).Сонымен қатар, осы гидрофобты галактозидтер болмаған кезде пайда болған жетілген жабайы типтегі биофильмдер IPTG қосу арқылы дисперсті болуы мүмкін.Керісінше, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) лектикасына жоғары жақындығы бар p-нитрофенил-альфа-L-фукозаны (NPF) қосу биоқабықшаның түзілуіне немесе дисперсті болуына әсер еткен жоқ.P. aeruginosa PAO1 планктондық өсуіне IPTG, NPG немесе NPF қатысуы әсер етпеді, сондай-ақ штамм бұл қанттарды көміртегі көзі ретінде пайдалана алмады, бұл биоқабықша түзілуіне байқалған әсерлер LecA-лигандының бәсекелес тежелуіне байланысты екенін көрсетеді. байланыстыру.Ұқсас нәтижелер болат купондарындағы динамикалық ағын жағдайында өсірілген биофильмдер үшін де алынды, бұл LecA әртүрлі қоршаған орта жағдайларында P. aeruginosa биофильмінің архитектурасына үлес қосатынын көрсетеді.

Арабидопсис өсімдіктерінің жапырақтарында ксилоглюкан олигосахаридтерінің бүйірлік тізбегінен т-фукозил қалдығын шығаруға қабілетті альфа-L-фукосидаза (EC 3.2.1.51) анықталды.Сонымен қатар, SDS-PAGE бетінде бір жолақты көрсету үшін, ұқсас субстрат ерекшелігі бар альфа-L-фукосидаза қырыққабат (Brassica oleracea) жапырақтарынан тазартылды.Осы белок жолағынан екі пептидтік тізбек алынды және олар AtFXG1 деп атауды ұсынатын альфа-фукосидазаны кодтайтын Арабидопсис генін анықтау үшін пайдаланылды.Сонымен қатар, белгілі альфа-L-фукосидазалары бар гомологиясы бар Arabidopsis гені де табылды және біз оны AtFUC1 деп атауды ұсындық.AtFXG1 және ATFUC1 екеуі де гетерологиялық түрде Pichia pastoris жасушаларында және қоректік ортаға бөлінген альфа-L-фукосидаза белсенділігінде экспрессияланды.AtFXG1 арқылы кодталған альфа-L-фукосидаза ксилоглюкан XXFG олигосахаридтеріне, сондай-ақ 2'-фукозил-лактитолға қарсы белсенді болды, бірақ p-нитрофенил-альфа-L-фукопиранозидке қарсы емес.Дегенмен, гетерологиялық түрде көрсетілген AtFUC1 тек 2'-фукозил-лактитолға қатысты белсенді болды.Осылайша, біріншісі ксилоглюкан метаболизмімен байланысты болуы керек.