ONPG CAS:369-07-3 98,0% Мин Ақтан Өшірулі -Ақ ұнтақ
| Каталог нөмірі | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Өнім атауы | ONPG(2-нитрофенил-бета-D-галактопиранозид) |
| Молекулалық формула | C12H15NO8 |
| Молекулалық салмақ | 301.25 |
| Сақтау мәліметтері | 2 - 8 °C |
| Үйлестірілген тарифтік кодекс | 29400000 |
Өнімнің сипаттамасы
| Тазалық (HPLC) | Мин.98,0% |
| Сыртқы түрі | Ақ немесе ақ түсті ұнтақ |
| Шешім(Суда 1%) | Мөлдір, түссізден сәл сарыға дейінгі ерітінді |
| Судың құрамы(Карл Фишер) | Макс.0,5% |
| Меншікті оптикалық айналу [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 ° C -73,0 ° C |
ONPG сынағы (β-галактозидаза сынағы) туралы талқылау
Жақында сұрақтар жиі көтерілді: 1. Неліктен ONPG сынағы кешіктірілген лактозаның ашытуын ажырату үшін қолданылуы мүмкін?2. Неліктен ұлттық стандартта ONPG сынағы үшін 3% натрий хлориді трисахаридті темірді (немесе трисахаридті темір) пайдалану қажет деп жазылған?3. Vibrio parahaemolyticus үшін OPNG сынамасын жүргізгенде неге стандартқа сәйкес толуолды тамшылатып қосу керек?Функция дегеніміз не?
Біздің компания көптеген ақпаратты қарап шықты, оны қорытындылады және төменде сізбен бөлісті:
Принцип: ONPG қытайша атауы - o-nitrobenzene-β-D-галактопиранозид.ONPG β-галактозидаза арқылы галактозаға және сары о-нитрофенолға (ONP) гидролизденуі мүмкін, сондықтан β-галактозидазаның белсенділігін қоректік ортаның түсінің өзгеруі арқылы анықтауға болады.
Лактоза - көптеген микроорганизмдер анықтауы керек қант.Оның метаболизмі екі ферментті қажет етеді, біреуі жасуша өткізгіштігі, лактоза өткізгіштік әсерінен жасушаларға енеді;екіншісі - β-галактозидаза, ол лактозаны галактозаға гидролиздейді.Лактоза және глюкоза.β-галактозидаза сонымен бірге оны галактозаға және сары о-нитрофенолға (ONP) гидролиздеу үшін ONPG-ге тікелей әсер ете алады.Мұны 24 сағат ішінде, тіпті лактозаны кешіктіретін ферментаторлармен де жасауға болады.Сондықтан ол агар қиғашынан 1 дақылын таңдап алып, оны 36°C температурада 1-3 сағат және 24 сағат бойы толық шеңберге егудің бақылау нәтижелерін түсіндіреді.Егер β-галактозидаза түзілсе 1-3сағ сарыға айналады, ондай фермент болмаса 24сағ түсін өзгертпейді.
Жоғарыда аталған екі ферментке сәйкес микроорганизмдерді келесі категорияларға бөлуге болады:
Пермеаза және β-галактозидазасы бар 1 лактозаны ашытатын (18-24 сағат) бактерия P+G+;
2 Пермезасы жоқ, бірақ галактозидазасы бар кешіктірілген лактоза ферменттері (24 сағаттан көп уақыт алады): P- G+.
3 Пермеаза да, галактозидаза да жетіспейтін лактоза емес ферменттер: P- G-.
ONPG сынағы лактозаны кешіктіретін бактерияларды (P-G+) ашымайтын лактоза бактерияларынан (PG-) ажырату үшін пайдаланылуы мүмкін, мысалы:
1 Кеш лактоза ферментерлерін (P- G+) лактоза емес ферментерлерден (P- G-) ажыратыңыз.
(a) Citrobacter (+) және Salmonella arizonae (+) сальмонелладан (-).
(б) Шигелла соннеиден (-) ішек таяқшасы (+).
Неліктен ONPG талдауы 3% натрий хлориді темір трисахаридінде (темір трисахариді) түнгі культураны қолдану арқылы орындалды?Біздің компания көптеген ақпаратпен кеңесті, бірақ нақты мәлімдеме жоқ.Тек FDA веб-сайтында "Үш еселенген қантты темір агарының қиғаштарына сыналатын дақылдарды егіңіз және 37°C температурада (немесе қажет болса басқа сәйкес температурада) 18 сағат бойы инкубациялаңыз. % лактозаны да қолдануға болады».білдіреді: зерттелетін бактериялар трисахаридті темір ортасына егілді және 37°C температурада 18 сағат бойы өсірілді.Құрамында 1% лактоза бар қоректік агардың қиғаштары (немесе басқа) ортасы да қолайлы.Сондықтан трисахаридті темір ортасының құрамында лактоза бар деген қорытынды шығарылады.Түнде өскеннен кейін бактериялар жақсы белсенді β-галактозидазаны өндірді.Мұндай бактерияларды пайдалана отырып, ONPG β-галактозидаза арқылы тезірек ыдырауы мүмкін.Эксперименттік құбылыс тезірек және жақсы көрінеді.Сонымен қатар, толуолды тамшылатып қосу және су моншасын 5 минут ішінде енгізу β-галактозидазаны толығымен босату үшін қажет.
