Өнімдер

Орбиталық фибробласттардың жетілген адипоциттерге дифференциациялануы және кейіннен май тінінің жиналуы Грейвс орбитопатиясының (ГО) прогрессиясында көрсетілген.Аутофагия адипогенезге қатысады, бірақ GO инициациясында және прогрессиясында аутофагияның рөлі туралы аз мәлімет бар.Бұл зерттеудің мақсаты GO патогенезіндегі аутофагияның рөлін зерттеу болып табылады. GO бар емделушілерден және қалыпты субъектілерден алынған орбитальды май/дәнекер тінінің экспланттары, сондай-ақ оқшауланған орбиталық фибробласттар талданған.Адипогенез сутегі асқын тотығы бар немесе онсыз дифференциалдаушы ортаны қолдану арқылы индукцияланды, ал аутофагия бафиломицин A1 және Atg5 мақсатты қысқа шаш қыстырғыш РНҚ (shRNA) көмегімен манипуляцияланды.Автофагосомалар электронды микроскоп арқылы анықталды.Аутофагияға байланысты гендердің экспрессиясы және адипогенезге байланысты транскрипция факторлары нақты уақыттағы кері транскрипция-полимеразды тізбекті реакция және/немесе Western blot талдауы арқылы талданды.Липид тамшыларының жинақталуы Oil Red O бояуы арқылы зерттелді. Аутофагиялық вакуольдер GO жасушаларында GO емес жасушаларға қарағанда көбірек болды (p<0,05).Аутофагиямен байланысты гендердің экспрессиясы GO тіндері мен жасушаларында олардың GO емес аналогтарына қарағанда айтарлықтай жоғары болды.Интерлейкин-1β GO жасушаларында LC3-II, p62 және Atg7 ақуызын арттырды.Аутофагосома жинақталуы адипогенездің 4-ші күні көрсетілді және липид тамшыларының түзілуімен бірге 10-шы күні төмендеді.LC3 және p62 белоктарының экспрессиясы дифференциациядан кейін 48 сағат ішінде артып, 4-10 күнге дейін бірте-бірте төмендеді. Бафиломицинді A1-мен емдеу және Atg5-ті shRNA арқылы нокдаундау липид тамшыларының жиналуын тежеп, адипогендік маркерлердің экспрессиясын басады. GO-да тіндер мен жасушалардың аутофагиясы жоғарылады. GO емес тіндер мен жасушалар аутофагия GO патогенезінде рөл атқарады деп болжайды.Аутофагия манипуляциясы GO үшін емдік мақсат болуы мүмкін.