Өнімдер

Флуоресцеин мен флуоресцеин метил эфирінің моногалактопиранозидтері: синтез, биотнилденген β-галактозидаза арқылы ферментативті гидролиз және трансляциялық диффузия коэффициентін анықтау.

Флуоресцеин моногликозидтері (d-галактопиранозид (FMG) және d-глюкопиранозид) және олардың метил эфирі (MFMG) ацетобромоглюкоза/галактоза және флуоресцеин метил эфирінен жақсы өнімділікпен дайындалды.Галакто туындыларының ферментативті гидролиздік тәжірибелері (биотинилденген β-галактозидазаны қолдану) жүргізілді және кинетикалық параметрлері есептелді.Гидролиз кезінде флуоресценция қарқындылығының 15-20 есе артуы байқалды.Қысқа уақытта және субстраттың төмен концентрациясында флуоресценцияның сызықтық жоғарылауы байқалды, бұл бұл қосылыстарды галактозидазалар үшін пайдалы және сезімтал зондтарды жасайды.MFMG үшін Михаэлис-Ментен тұрақтысының (Км) шамасы FMG шамасынан жоғары, бұл фторогендік субстраттың ықтимал конформациялық өзгеруін болжайды.FMG бар биотинилденген β-Гал үшін Km мәні нативті ферментке қарағанда төмен.Бұл бақылау табиғи ферментпен салыстырғанда биотинленген ферменттің субстратқа жақындығын көрсетеді.Флуоресценциялық корреляция спектроскопиясының көмегімен фторогенді субстраттар үшін де, өнімдер үшін де трансляциялық диффузия коэффициенттері өлшенді.Фторогенді субстраттар мен ферменттік гидролиз өнімдері үшін трансляциялық диффузия коэффициенттері 3,5–4,5 × 10−10 м2 с−1 диапазонында ұқсас болып өлшенді.Осылайша, субстрат пен өнімнің трансляциялық қозғалғыштығындағы айырмашылыққа байланысты ферментативті кинетиканың күшеюі немесе баяулауы айқын емес.