Өнімдер

С гепатиті (HCV), аутоиммунды гепатит (AIH) және біріншілік билиарлы цирроз (ПБК) сияқты бауыр циррозы ауруларының патогендік молекулалық жолдары нашар сипатталады.Аурудың патогенезінде дифференцияланған гендер жиі маңызды.Супрессиялық субтрактивтік будандастыру (SSH) – дифференциалды экспрессиялық мРНҚ транскрипттерін байытатын геномдық тәсіл.Біз SSH көмегімен цирроздағы дифференциалды ген экспрессиясының жаңа бақылауларын жасауды мақсат еттік, ол нақты уақыттағы кері транскриптазалық полимеразды тізбекті реакциямен (RT-PCR) біріктірілген.HCV циррозы, AIH циррозы, PBC және ауру емес бауыр тініндегі бауыр транскриптомдары SSH арқылы зерттелді.Алынған комплементарлы ДНҚ (cDNA) клондары нүктелік гибридизация арқылы дифференциалды экспрессия үшін қайта скринингтен өтті, содан кейін тізбектелді.Таңдалған ген экспрессиясы нақты уақыттағы RT-ПТР арқылы сандық анықталды.SSH-дан кейін дифференциалды ген экспрессиясы үшін 694 клон қайта скринингтен өтті, оның 145-і реттелген және 89 түрлі геннен алынғаны анықталды.Жеті клон тек белгілі функциясы жоқ гендерді кодтайтын экспрессиялық тізбек тегімен (EST) гомологты болды.Төрт геннің жоғары реттелетін экспрессиясы нақты уақыттағы RT-ПТР арқылы расталды: цирроздың барлық түрлерінде трансмембраналық 4 суперфамилия мүшесі 3 (тетраспанин CO-029), AIH циррозында кірпі әрекеттесетін ақуыз (HIP) және хитиназа 3 ұқсас-1 (HC gp-39 немесе ykl-40) және HCV циррозында аргинин-глутамин қышқылының қайталануы (RERE).Барлық зерттелген тіндерде RERE генінің полиморфизмдері мен сплайс нұсқалары байқалды.Тетраспанин CO-029 жоғарылауы негізінен өт түтік жасушаларында локализацияланған.Қорытындылай келе, адам циррозындағы дифференциалды ген экспрессиясының жаңа бақылаулары SSH көмегімен негізгі ашу құралы ретінде жасалды.Атап айтқанда, HCV-мен байланысты бауыр ауруында RERE генін және оның өнімдерін одан әрі зерттеуге кепілдік беріледі.